Метод флуоресцирующих антител

Метод флуоресцирующих антител

Метод флуоресцирующих антител (МФА) (англ. Immunofluorescence) — лабораторный иммунологический метод качественного определения антигена по известному глобулину или антител по известному антигену.

Сущность и классификация МФА

Сущность метода флюоресцирующих антител заключается в визуализации реакции антиген-антитело люминесцентными маркерами. Метод конъюгации глобулинов с органическими флюорохромами разработан в 1942 году А. Кунсом (англ.)русск..[1]

Различают МФА прямой, разработанный А. Кунсом и Мелвином Капланом,[2] МФА непрямой, разработанный А. Кунсом и Уиллером и непрямой МФА с комплементом.

При прямом методе (пМФА) на препарат с антигеном наносят известную, предположительно соответствующую ему, люминесцирующую сыворотку. В случае образования комплекса, он обнаруживается, люминесцентной микроскопией в виде зеленоватого свечения разной степени интенсивности и четкости.

При непрямом методе (нМФА) на мазок из наслоения антигена и немеченой сыворотки наносят антиглобулиновую (видовую по отношению к диагностической сыворотке) люминесцирующую сыворотку. В случае образования комплекса антиген-антитело, последний компонент реагирует с видовой антиглобулиновой люминесцирующей сывороткой. При нМФА с комплементом, его добавляют к комплексу антиген-антитело и идентифицируют образование тройного комплекса по люминесцирующей антикомплементарной сыворотке.

Результаты описываются в так называемых «крестах» (от одного + до четырех ++++) — субъективная градация исследователем степени выраженности реакции. Непрямые методы требуют наличия только антиглобулиновых видовых сывороток с флюорохромами, но при этом необходимо большое количество тестовых контролей. При постановке прямым методом делается только один контроль, но требуется множество моноспецифических сывороток. Недостатками всех видов МФА является ограниченная чувствительность из-за наличия возможных перекрестных реакций между близкими по антигенному составу объектами и неспецифическая флуоресценция вследствие адсорбции флуоресцирующих глобулинов на различных элементах препарата. В настоящее время используются коммерческие стандартные конъюгаты, содержащие глобулины к исследуемым антигенам. Метод флуоресцирующих антителШаблон:Http://vetl.ru/metod-fluoresciruyushhix-antitel/

Примечания

  1. ↑ A. H. Coons, H. J. Creech, R. N. Jones, E. Berliner (нем.)русск., The demonstration of pneumococcal antigen in tissues by the use of fluorescent antibody, J. Immunol. 45, 1942, pp. 159—170
  2. ↑ A. H. Coons, M. H. Kaplan, Localization of antigen in tissue cells. II. improvements in a method for the detection of antigen by means of fluorescent antibody, J. Exp. Med., 91(1), pp. 1-13

Wikimedia Foundation. 2010.

Игры ⚽ Нужно сделать НИР?

Полезное


Смотреть что такое "Метод флуоресцирующих антител" в других словарях:

  • метод флуоресцирующих антител — Метод обнаружения белков или других антигенов в микроскопических объектах или биологических жидкостях с помощью антител, помеченных флуоресцирующими красителями (введение флуоресцирующей метки в антитела позволяет делать видимым их комплекс с… …   Справочник технического переводчика

  • метод флуоресцирующих антител — fluorescent antibody technique метод флуоресцирующих антител. Метод обнаружения белков или других антигенов в микроскопических объектах или биологических жидкостях с помощью антител, помеченных флуоресцирующими красителями (введение… …   Молекулярная биология и генетика. Толковый словарь.

  • Иммунофлуоресцентный анализ — Метод флуоресцирующих антител (МФА, иммунофлуоресценция) (англ. Immunofluorescence)  лабораторный иммунологический метод качественного определения антигена по известному глобулину или антител по известному антигену. Сущность и… …   Википедия

  • ВИРУСОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ — вирусологические исследования, комплекс методов исследования, позволяющих распознать этиологию вирусного заболевания и изучить его возбудителя.Основными этапами В. и. являются выделение вируса от больных и павших животных (взятие, консервирование …   Ветеринарный энциклопедический словарь

  • МАРЕКА БОЛЕЗНЬ — Рис. 1. Невральная форма болезни Марека. Рис. 1. Невральная форма болезни Марека: спастический парез пальцев конечностей у курицы. Марека болезнь [по имени венг. учёного И. Марека (J. Marek)], нейролимфоматоз птиц, инфекционная болезнь птиц,… …   Ветеринарный энциклопедический словарь

  • Флуоресцирующие антитела — метод флуоресцирующих антител применяется для обнаружения белков или других антигенов в микроскопических объектах или биологических жидкостях с помощью антител, помеченных флуоресцирующими красителями (введение флуоресцирующей метки в антитела… …   Официальная терминология

  • Чумка собак — У этого термина существуют и другие значения, см. Чумка. Чума плотоядных (болезнь Каре)  острая или подострая контагиозная вирусная болезнь, проявляющаяся лихорадкой, катаральным воспалением слизистых оболочек, поражениями кожи, центральной… …   Википедия

  • ВИРУСНАЯ ДИАРЕЯ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА — Поражения слизистой оболочки ротовой полости при вирусной диарее крупного рогатого скота. Поражения слизистой оболочки ротовой полости при вирусной диарее крупного рогатого скота: 1 — дёсен верхней челюсти; 2 — дёсен нижней челюсти.… …   Ветеринарный энциклопедический словарь

  • Африканская чума свиней — Цианоз кожи уха у свиньи, больной африканской чумой свиней Африканская чума свиней (лат. Pestis africana suum), африканская лихорадка, восточноафриканская чума, болезнь Монтгомери  …   Википедия

  • Классическая чума свиней — (лат. Pestis suum) вирусная болезнь свиней, характеризующаяся лихорадкой, поражением кровеносных сосудов и кроветворных органов, крупозно дифтеритическим воспалением слизистой оболочки толстых кишок. Регистрируется во всех странах. Классическая… …   Википедия


Поделиться ссылкой на выделенное

Прямая ссылка:
… Нажмите правой клавишей мыши и выберите «Копировать ссылку»